Abstrak
Peroksigenase tak spesifik (UPO) merupakan biokatalis yang menjanjikan untuk oksifungsionalisasi selektif. Dibandingkan dengan sitokrom P450, potensi katalitik UPO kurang diteliti, sebagian besar karena keragaman alaminya yang terbatas dan tantangan yang terkait dengan pengoptimalannya melalui rekayasa enzim. Dalam penelitian ini, kami merekayasa UPO dari Aspergillus niger (AniUPO) untuk mengkatalisis α-hidroksilasi enantioselektif dari β-ketoester, transformasi berharga yang belum terwujud dalam biokatalisis. Melalui rekayasa enzim, dua varian AniUPO, AniUPO-M3 dan AniUPO-M6, dikembangkan untuk menghasilkan berbagai macam α-hidroksi β-ketoester yang diperkaya enantioselektif, mencapai hasil hingga 97%, angka perputaran total (TTN) 4140, dan rasio enantiomerik (er) >99:1. Proses biokatalitik beroperasi dalam kondisi ringan dan dapat ditingkatkan untuk aplikasi preparatif. Studi ini memperluas cakupan katalitik UPO dan meningkatkan potensinya untuk aplikasi industri.